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(4)為什么PCR擴(kuò)增的結(jié)果不理想?
時(shí)間：2018-05-10 來源：EASTWIN瀏覽次數(shù)：161
龍龍：這是個(gè)比較復(fù)雜的問題，影響因素比較多。有試劑的原因、有操作的原因、有程序的原因、有耗材的原因。就機(jī)器本身來說，可以從以下幾個(gè)方面進(jìn)行分析和解決。
1. 機(jī)器的溫度不準(zhǔn)確，偏差較大。大多發(fā)生于老舊機(jī)器，傳感器損壞。只能返廠維修。
2. 溫度均勻性不夠。半導(dǎo)體制冷片部分失效導(dǎo)致。大多發(fā)生于老舊機(jī)器，但不排除個(gè)別新機(jī)器上也會發(fā)生，因?yàn)?，半?dǎo)體制冷器的壽命是無法準(zhǔn)確預(yù)測的。建議返廠維修。
3. PCR程序不是最優(yōu)。如：PCR反應(yīng)時(shí)間過短，導(dǎo)致反應(yīng)不充分。在選擇反應(yīng)體系時(shí)，實(shí)際體系與選擇的體系不符，導(dǎo)致實(shí)際熱平衡時(shí)間延長，從而擠占了反應(yīng)的時(shí)間，造成反應(yīng)不充分，如50ul的試劑，選擇了15ul反應(yīng)體系。所以要仔細(xì)檢查反應(yīng)體系的選擇，選擇最接近實(shí)際的反應(yīng)體系。
4. PCR試管的形狀與PCR儀Block上的孔的形狀不貼合，有間隙，影響熱傳導(dǎo)，從而導(dǎo)致熱平衡時(shí)間延長，或根本達(dá)不到反應(yīng)溫度，最終導(dǎo)致PCR反應(yīng)效率降低。這是客戶反應(yīng)最多的問題之一，絕大部分原因是由于客戶使用了不合格的試管耗材。不同廠家的PCR試管，其形狀、錐度、管壁的厚薄、管壁的均勻性等相差很多，對實(shí)驗(yàn)結(jié)果有著直接影響。浙江杭州一高校購買了我們的ETC811PCR儀，可是老師反應(yīng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果就是不好，說溫度有問題，機(jī)器返廠后檢查溫度，一切正常。機(jī)器返回實(shí)驗(yàn)室后，老師說實(shí)驗(yàn)的效果還是不好。無奈，我們的工程師上門檢查，一看其所用的試管就知道問題出在了哪里。建議他們更換愛思進(jìn)的耗材，實(shí)驗(yàn)的效果完全正常，老師恍然大悟。為此我們還專門研究了這種耗材的差別，如圖所示：
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如遇到其他問題，也可隨時(shí)電聯(lián)我們的售后工程師楊工，電話：18051112172。蘇州東勝興業(yè)科學(xué)儀器有限公司提供給您最可靠的服務(wù)保障?。?！
